pET28-SpCas9 质粒是 SpCas9 蛋白的表达质粒，用于在大肠杆菌 BL21(DE3)菌株中表达制备 SpCas9 蛋白。SpCas9 来源于 S. pyogenes 菌株，是依赖于 crRNA 和 tracrRNA(或连接后形成的 sgRNA)引导的 DNA 内切核酸酶，在靶标双链 DNA 存在 PAM(NGG)的情况下，特异地切割靶标双链 DNA，使 DNA 双链断裂并生成平末端。PAM 对于 SpCas9 的识别和切割都是必的，其切割位点位于目标序列(target sequence)内，离 PAM 区3 个碱基。