Rosetta(DE3)是在大肠杆菌BL21(DE3)基础上携带额外质粒所得衍生菌株。该质粒含有一个氯霉素抗性基因且可转录产生识别6种大肠杆菌的稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA)的tRNA(这些tRNA是由它们天然的启动子驱动转录的)，因此Rosetta(DE3)能够大大提高外源基因(特别是真核基因)在原核系统中的表达水平。同时，Rosetta(DE3)的染色体上整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶)，受到lacUV5启动子控制，外源添加IPTG可以诱导该菌株中T7 RNA聚合酶的快速表达。T7 RNA聚合酶进而识别表达质粒载体上的的T7启动子(例如pET系列，pGEX，pMAL等质粒)，从而驱动重组蛋白的高效表达。经pUC19质粒转化检测，Rosetta(DE3)感受态细胞的转化效率可达107 cfu/μg DNA。