Y187

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CC96404-01 吐露港(TOLOBIO) 10×100 µL ¥216

Description

Y187 菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂、双杂实验用菌株,MATα型,可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株 (Y2HGold,AH109等)通过mating操作进行筛库试验。Transformation marker为: trp1, leu2。报告基因为:lacZ,MEL1。Y187-GAL4 酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:pGADT7和pGBKT7。质粒pGADT7的筛选标志为LEU,用于表达AD (GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白;质粒pGBKT7的筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD (来自酵母转录因子GAL4N端 1~174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白。GAL4系统原理:一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1~174位氨基酸区段的DNA结合域(DNA-BD)和位于C端768~881 位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下,BD不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成bait融合蛋白(bait–BD)和prey融合蛋白(prey-AD),如果bait 和prey发生相互作用,就会促使BD和AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。Y187的两个报告基因(lacZ,MEL1),分别由两种不同的启动子(G1,M1)启动,这两种启动子只有GAL4识别的17 bp核心区相同,其余部分均不同,因此酵母双杂假阳性发生的概率大大降低。Y187感受态细胞经特殊工艺制作,pGADT7 质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
Y2HGold Y2HGold
Cat. No.: 50-81-7
Y1HGold Y1HGold
Cat. No.: 50-81-7
AH109 AH109
Cat. No.: 50-81-7