CRISPR/Cas系统是普遍存在于细菌和古菌中的一类古老的免疫系统,用于抵御防御外源遗传元件(例如噬菌体)入侵。通过对它们的研究,科学家们开发出了CRISPR/Cas相关的一系列强大的基因编辑工具,是生物技术领域的重大突破之一。
CRISPR/Cas系统
CRISPR/Cas系统是原核生物的一种天然免疫系统,当某些细菌遭到病毒入侵后,能够把病毒基因的一小段存储到自身DNA里,这一存储空间被称为CRISPR。病毒再次入侵时,细菌能根据存写的片段识别病毒,用“基因魔剪”Cas(CRISPR associate system)蛋白将病毒的DNA切断[1]。
◆CRISPR/Cas系统组成
CRISPR/Cas系统由两个部分:CRISPR基因序列与基因组成[2]。
●CRISPR基因序列
由前导序列(leader)、重复序列(repeat)和间隔序列(spacer)构成。
①前导序列:富含AT碱基,位于CRISPR基因上游,被认为是CRISPR序列的启动子。
②重复序列:长度约20–50bp碱基,包含5–7bp回文序列,转录产物可以形成发卡结构,用于稳定RNA的整体二级结构。
③间隔序列:即被细菌俘获的外源DNA序列,相当于细菌免疫系统的“黑名单”,当这些外源遗传物质再次入侵时,CRISPR/Cas系统就会予以精准打击。
●Cas基因
位于CRISPR基因附近或分散于基因组其他地方,该基因编码的蛋白均可与CRISPR序列区域共同发生作用,在防御过程中至关重要,目前已经发现了Cas1-Cas10等多种类型的Cas基因。