Rosetta 2(DE3) pLysS来源于Rosetta(DE3)，本菌株含有pRARE2质粒，除了能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有的AUA，AGG，AGA，CUA，CCC和GGA六个稀有密码子的tRNA外，还提供了第七个稀有密码子CGG的tRNA。同时，pRARE2质粒具有氯霉素抗性。Rosetta2(DE3) pLysS载体通过提供稀有密码子，使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌，能够提供更加“通用”的蛋白质表达，从而提升目的蛋白表达水平。DE3是溶源性的λDE3，所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝，因此适用于pET系列载体及其他T7启动子系列载体。该菌株含有pLysS质粒，能够产生T7溶菌酶，可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLysS质粒的起始复制位点是p15 Origin，这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。经pUC19质粒转化检测，Rosetta2(DE3) pLysS感受态细胞的转化效率可达108 cfu/μg DNA以上。