Un1Cas12f1 (Cas14a1)

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Description

Un1Cas12f1(又名Cas14a1)是依赖于crRNA和tracrRNA共同介导的(或融合后的sgRNA单独介导的)DNA核酸内切酶,能特异结合并切割靶标ssDNA,且不受PAM位点的限制。此外,Un1Cas12f1也能以PAM依赖的方式特异地剪切靶标dsDNA,使DNA双链断裂并生成粘性末端。与其他Cas12蛋白类似,Un1Cas12f1蛋白同样拥有针对ssDNA的反式切割活性(即旁路剪切活性/附属剪切活性),双链或单链DNA靶标均能激活Un1Cas12f1的反式剪切活性,即当Un1Cas12f1蛋白与sgRNA、靶标DNA结合形成三元复合物后,便会被激活针对非特异序列ssDNA的反式剪切活性,将体系中的任意序列ssDNA切碎。相比于其他的Cas蛋白,Cas12f1蛋白的分子量普遍较小(400~700AA),其中Un1Cas12f1的分子量约61.5 kD,可用于靶标核酸的分子检测(详细信息请参考PMID: 30337455)。